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BCR-ABL1 [E255V/T315I]/BaF3

CBP73277

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I. Background
      BCR-ABL1 基因是由 9 號染色體 ABL1 基因與 22 號染色體 BCR 基因易位形成的融合 基因(t(9;22) (q34;q11)),產生費城染色體,其編碼的融合蛋白具有異常酪氨酸激酶活性, 持續(xù)激活 JAK/STAT、PI3K/AKT 等信號通路,驅動慢性髓性白血?。–ML,占 95%以上 病例)、部分急性淋巴細胞白血?。ˋLL)及急性髓系白血?。ˋML)的發(fā)生發(fā)展。該基 因主要存在 M-BCR(P210)、m-BCR(P190)、μ-BCR(P230)等轉錄本類型,罕見融 合需通過 NGS 檢測。臨床診斷依賴細胞遺傳學(核型分析、FISH)及分子生物學(QT- PCR 定量監(jiān)測轉錄本、NGS 檢測突變)手段。
 
II. Description
      BaF3(小鼠原 B 細胞)的生長和增殖需要 IL-3 的維持。通過引入各種表達激酶的基因, 能作為 BaF3 的驅動基因,讓 BaF3 不再依賴 IL-3 而增殖,進而激酶基因成為 BaF3 增殖依賴的驅動基因,用于評估小分子藥物對激酶的靶向抑制作用,原理及流程見下圖所示。



Figure 1. 
BCR-ABL1[E255V_T315I] BaF3 細胞的構建原理圖
 
III. Introduction

Cell Line Name:

BCR-ABL1 [E255V/T315I]/BaF3

Host Cell:

BaF3

Stability: 32 passages (in-house test, that not means the cell line will be instable beyond the passages we tested.)

Application:

Anti-proliferation assay and PD assay

Freeze Medium:

90% FBS+10% DMSO

Complete Culture Medium:

RPMI-1640+10%FBS

Mycoplasma Status:

Negative

 
IV. Representative Data

1. WB of BCR-ABL1 [E255V/T315I]/BaF3


Figure 2. WB of BCR-ABL1 [E255V/T315I]/BaF3.

2. Sanger of BCR-ABL1 [E255V/T315I]/BaF3

a. Fusion

b. Mutation-E255V 

c.Mutation-T315I 

Figure 3. Sanger of BCR-ABL1 [E255V/T315I]/BaF3.

3. Anti-proliferation assay

Figure 4. CTG Proliferation Assay of BCR-ABL1 [E255V_T315I]  BaF3(C1).

 

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